protected void Button1_Click(object sender, EventArgs e)
{
this.SqlDataSource1.Insert();
string filepath = "", filename = "", mfilename, mfilepath;
if(""!=FileUpload1.PostedFile.FileName)
{
filepath = FileUpload1.PostedFile.FileName;
filename = filepath.Substring(filepath.LastIndexOf(".") + 1);
try
{
mfilepath = Server.MapPath("ima/");
mfilename = filepath.Substring(filepath.LastIndexOf("\\") + 1);
string strsql = "insert into userinfo(imagepath)values('" + mfilepath + "')";
con = new SqlConnection(strCon);
con.Open();
SqlCommand cmd = new SqlCommand(strsql, con);
cmd.ExecuteNonQuery();
con.Close();//这句怎么不执行？？？？

}
catch { Response.Write("<scrip>alert('上传文件不存在')</scrip>"); }
}

cmd.ExecuteNonQuery();
你是不是這句出錯，然後直接跳到catch中去了？那樣是不會執行下面的close方法的。

再加个finally

con.Close();//这句怎么不执行？？？？
那就把這句放在finally裡面吧。

   finally 没用过 ^_^!

this.SqlDataSource1.Insert();这句是不是会跟另外的操作数据库有冲突阿？
错误提示是
不能将值 NULL 插入列 'username'，表 'E:\会员注册\APP_DATA\DATABASE.MDF.dbo.userinfo'；列不允许有空值。INSERT 失败。语句已终止。

this.SqlDataSource1.Insert();这是插入一条数据，原来的下面是插入一条数据
只要把原来的插入改为更新就可以了

string filepath = "", filename = "", mfilename, mfilepath;
if ("" != FileUpload1.PostedFile.FileName)
{
filepath = FileUpload1.PostedFile.FileName;
filename = filepath.Substring(filepath.LastIndexOf(".") + 1);

try
{
mfilepath = Server.MapPath("ima/");
mfilename = filepath.Substring(filepath.LastIndexOf("\\") + 1);
string strsql = "update userinfo set imagepath='ima\\"+mfilename+"'where username='"+TextBox1.Text+"'" ;
con = new SqlConnection(strCon);
con.Open();
SqlCommand cmd = new SqlCommand(strsql, con);
cmd.ExecuteNonQuery();

con.Close();

}

错误提示是
不能将值 NULL 插入列 'username'，表 'E:\会员注册\APP_DATA\DATABASE.MDF.dbo.userinfo'；列不允许有空值。INSERT 失败。语句已终止。
不是你改update的問題，是你以前的insert語句insert into userinfo(imagepath)values('" + mfilepath + "')";
的問題。說你的列'username'不能為空，也就是說你這個字段設置不能為空，那麼就要在插入語句裡面加入這個字段：
insert into userinfo(username,imagepath)values('yourname','" + mfilepath + "')";

而且，你把你的insert改成update難道不會對你的操作造成不同的影響嗎？